Чочконун курч ич өткөк синдрому коронавирустун IgG антителосун аныктоо үчүн кыйыр ELISA ыкмасын иштеп чыгуу рекомбинантты протеинге негизделген.

Чочколордун курч ич өткөөл синдрому Coronavirus (SADS-CoV) — жаңы төрөлгөн чочколордун ичеги-карын патогендик коронавирусу, ал жаңы төрөлгөн чочколордун суулуу диареясын алып келиши мүмкүн жана чочко тармагына олуттуу экономикалык жоготууларды алып келет.Азыркы учурда SADS-CoV инфекциясынын жана вакцинанын эффективдүүлүгүн баалоо үчүн ылайыктуу серологиялык ыкма жок, ошондуктан бул жетишсиздиктин ордун толтуруу үчүн эффективдүү ферментке байланышкан иммуносорбент анализин (ELISA) колдонуу зарыл.Бул жерде адамдын IgG Fc домени менен бириктирилген SADS-CoV спике (S) протеинди экспрессиялаган рекомбинантты плазмид рекомбинантты бакуловирусту өндүрүү үчүн курулган жана HEK 293F клеткаларында экспрессияланган.S-Fc протеини G протеининин чайыры менен тазаланат жана анти-адам Fc жана анти-SADS-CoV антителолору менен реактивдүүлүгүн сактайт.Андан кийин S-Fc протеин кыйыр ELISA (S-iELISA) иштеп чыгуу жана S-iELISA реакция шарттарын оптималдаштыруу үчүн колдонулган.Натыйжада, иммунофлуоресценция анализи (IFA) жана вестерн блоттинги менен тастыкталган 40 SADS-CoV терс сыворотканын OD450nm маанисин талдоо менен, кесүү мааниси 0,3711 деп аныкталды.6 SADS-CoV позитивдүү сары сыворотканын өзгөрүү коэффициенти (CV) S-iELISA иштетүүнүн ичиндеги жана анын аралыгындагы бардыгы 10%дан аз болгон.Кайчылаш реактивдүүлүк тести S-iELISA башка чочконун вирус сывороткасы менен кайчылаш реакцияга ээ эмес экенин көрсөттү.Кошумчалай кетсек, 111 клиникалык сыворотка үлгүлөрүн аныктоонун негизинде IFA жана S-iELISA жалпы дал келүү көрсөткүчү 97,3% түздү.Сыворотканын 7 түрдүү OD450nm маанилери менен вирусту нейтралдаштыруу тести S-iELISA тарабынан аныкталган OD450nm мааниси вирусту нейтралдаштыруу тести менен оң корреляцияланганын көрсөттү.Акыр-аягы, S-iELISA 300 чочко фермасынын сывороткасы үлгүлөрүндө жүргүзүлдү.Башка чочко энтеровирустарынын коммерциялык комплекттери SADS-CoV, TGEV, PDCoV жана PEDVнин IgG оң көрсөткүчтөрү тиешелүүлүгүнө жараша 81,7%, 54% жана 65,3% экенин көрсөттү., 6%, тиешелүүлүгүнө жараша.Натыйжалар S-iELISA спецификалык, сезгич жана кайталануучу экенин көрсөтүп турат жана чочко тармагында SADS-CoV инфекциясын аныктоо үчүн колдонулушу мүмкүн.Бул макала автордук укук менен корголгон.Бардык укуктар корголгон.


Посттун убактысы: 22-июнь-2021